写于 2017-03-02 07:17:11| 澳门拉斯维加斯线上娱乐| 澳门拉斯维加斯的网址

基本原理:血小板衍生生长因子(PDGF)促进肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的增殖和迁移,并可能在肺动脉高压(PAH)的进展中发挥作用,这是一种以PASMC增殖为特征的病症,导致小肺动脉阻塞目的:分析PDGF在特发性PAH中的表达和致病作用方法:PDGF和PDGF受体mRNA表达通过实时逆转录 - 聚合酶链反应研究激光捕获显微切割肺动脉来自患者用于特发性PAH的肺移植免疫组织化学用于定位PDGF,PDGF受体和磷酸化PDGFR-β伊马替尼对PDGF-B诱导的增殖和趋化性的作用在人PASMC上测试测量和主要结果:PDGF-A,PDGF-B ,来自患者的小肺动脉中PDGFR-α和PDGFR-βmRNA表达增加显示特发性PAH,与对照组相比,Western blot分析显示PAH肺中PDGFR-β蛋白表达显着增加,与对照肺相比,在小型重塑肺动脉中,PDGF-A和PDGF-B主要定位于PASMCs和内皮细胞

细胞(血管周围炎性浸润,如果存在,显示强烈染色),PDGFR-α和PDGFR-β主要染色PASMCs和较小程度的内皮细胞增殖肺血管病变染色磷酸化PDGFR-βPDGF-BB诱导的PASMCs增殖和迁移伊马替尼抑制这种作用这种作用不是由于PASMC凋亡的结果

结论:PDGF可能在人PAH中发挥重要作用新的靶向PDGF途径的治疗策略应该在临床试验中进行测试关键词:伊马替尼;肺动脉高压;血小板衍生生长因子;重塑;平滑肌细胞肺动脉高压(PAH)的特征是肺血管阻力逐渐增加,导致右心室衰竭并最终死亡(1)小肺动脉重塑代表了与PAH相关的主要病理学发现,肺动脉平滑增生肌细胞(PASMCs)导致阻塞肺动脉阻塞(2,3)PAH的发病机制已经描述了几种机制,包括与当前治疗靶点相关的机制,如内皮素-1,前列环素和一氧化氮(1) ,3)近年来,在遗传性PAH中识别转化生长因子-b超家族(4)受体成员基因的种系突变,强调了生长因子在PAH发展中的潜在作用

其中,血小板衍生生长因子(PDGF)已被确定为PAH中新的可能治疗靶点(5,6)

活性PDGF由...构建形成同源或异源二聚体并刺激α-和β细胞表面受体的多肽(A链和B链)最近,已鉴定出另外两种PDGF基因,编码PDGF-C和PDGF-D多肽(8)PDGF是由许多不同细胞类型合成,包括平滑肌细胞(SMC),内皮细胞和巨噬细胞(7)PDGF具有诱导SMC和成纤维细胞增殖和迁移的能力,并且已被提议作为进展中的关键介质

几种纤维增生性疾病,如动脉粥样硬化,肺纤维化和肺动脉高压(6-8)它还可以在体外诱导大鼠主动脉条收缩(9)新型治疗药物如甲磺酸伊马替尼(Gleevec; Novartis,Horsham,UK)抑制几种与疾病状态相关的酪氨酸激酶,包括慢性粒细胞白血病患者的BCR-ABL(断点簇区域Abelson),胃肠道间质瘤患者的c-kit,以及PDGF受体α和β患有某些骨髓增生性疾病和皮肤纤维肉瘤突起的患者(10,11)伊马替尼已被证实可逆转肺动脉高压动物模型中的肺血管重塑(6),并且在人类PAH中也报道了一些临床和血液动力学改善的病例( 12-14)由于缺乏全面的人体数据,我们对PDGF在人PAH中的致病作用进行了全面分析 我们首次证实PDGF和PDGF受体的表达增加是通过实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对激光捕获显微切割的肺动脉进行的,肺移植患者表现出严重的特发性PAH蛋白质印迹分析显示PDGFR-β增加与对照组相比,PAH肺中的蛋白表达随后用免疫组织化学技术定位PAH肺中PDGF-A和PDGF-B以及PDGFR-α和PDGFR-β蛋白

西方研究了伊马替尼对培养的PASMCs中PDGFR磷酸化的影响通过荧光检测caspase 3和7活性分析PASMC细胞凋亡

最后,我们分析了伊马替尼对PDGF-B诱导的增殖和对对照和PAH PASMCs的趋化作用的影响我们的数据支持PDGF在肺内过量产生的概念

PAH患者的动脉壁并促进肺动脉重塑方法肺样本和PASMC培养在肺移植时(PAH,n = 13)获得人肺标本,或从肺叶切除术或肺切除术期间获得的局部肺癌组织(对照组,n = 8),然后快速冷冻或石蜡包埋,如前所述(15) PASMCs如前所述从相同的外植体培养(16)

简而言之,动脉(直径:5-10mm)保持在4℃的Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)中,然后是它们的内膜细胞层和残留的外膜

用镊子剥离组织然后将切开的血管培养基切成小块(3-5mm),将其转移到细胞培养瓶中

为了使PASMCs长出,将血管组织在补充有20的DMEM中培养

%胎牛血清(FCS),2 mM L-谷氨酰胺和抗生素(100 U / ml青霉素和01 mg / ml链霉素)孵育2周后,在培养基中收集的PASMC和血管组织转移到新的细胞培养物闪光ks本研究得到当地伦理委员会的批准,患者同意参与研究激光捕获显微切割肺动脉,cDNA制备和RT-PCR使用ASLMD激光捕获小肺动脉(100-200μm)显微切割显微镜(Leica,Rueil-Malmaison,France)用PicoPure RNA分离试剂盒(Arcturus,Mountain View,CA)从显微切割的肺动脉中提取RNA,然后从硅酸盐柱上洗脱并使用Sensiscript Reverse Transcription试剂盒(Qiagen,逆转录)进行逆转录

Courtaboeuf,法国)选择组成型表达的β-肌动蛋白作为内部管家基因对照,用于比较循环阈值(CTau)方法,用于PDGF-A和PDGF-B,PDGF受体α和βPDGF-A和PDGF的相对定量

-B,PDGF受体α和β,以及β-肌动蛋白表达通过RT-PCR用TaqMan基因表达测定法(括号中的测定ID号)定量(β-肌动蛋白[Hs99999903_m] 1],PDGF-A [Hs00234994_m1],PDGFR-α[Hs00183486_m1],PDGF-B [Hs00234042_m1],PDGFR-β[Hs00182163_m1])和Taq-Man Universal PCR Master Mix在ABI Prism 7000序列检测系统上进行( Applied Biosystems,Courtaboeuf,France)Western Blot将来自10名对照受试者和10名PAH患者的肺组织样品在含有50mM Tris-HCl,pH 74,50mM NaCl,15mM乙二胺四乙酸,1%Triton X-的裂解缓冲液中匀浆

100%,3%甘油,02mM原钒酸盐和蛋白酶抑制剂混合物(阿普罗汀,亮抑肽和PefaBloc [Roche,Meylan,France])将裂解物标准化并在8%聚丙烯酰胺凝胶上分离并转移到硝酸纤维素膜上

封闭后,膜为用兔抗PDGFR-β(1μg/ ml,cat no sc432)或抗磷酸-PDGFR-β(1μg/ ml,cat no sc12909-R)和抗肌动蛋白-β探测加载对照(02μg/ ml,cat no sc-1615)(均来自Santa Cruz Biotechnology,Inc,Santa Cruz,CA),然后孵育与辣根过氧化物酶缀合的二抗通过化学发光使用增强化学发光(ECL)检测系统(Millipore,Paris,France)检测结合抗体,并通过光密度测定法定量 免疫组织化学免疫组织化学在8mm厚的冷冻组织切片(PDGF-AA和PDGF-BB,PDGFR-α和PDGFRb)上或在3μm厚的石蜡包埋组织切片(PDGF-)上进行

BB,磷酸化的PDGFR-β,增殖细胞核抗原[PCNA])在常规制备和微波暴露后,用兔抗PDGF-BB(1μg/ ml,ab15499; Abcam,Paris,France)处理载玻片, PDGFR-β(2μg/ ml,sc-432),PDGF-AA(2μg/ ml,sc-128),PDGFR-α(2μg/ ml,sc-338) ,磷酸-PDGFR-β(2μg/ ml,sc-12909-R)和PCNA(2μg/ ml,sc-7907)(所有sc目录号均来自Santa Cruz Biotechnology,Inc)根据制造商的建议,Envision试剂盒(K4065; Dako,Trappes,France)用于一抗检测用于这些抗体的对照包括遗漏一抗和用兔IgG替代一抗PASMC增殖试验PASMCs是血清 - 明星为4 8小时(02%FCS),然后与PDGF-BB(10和50ng / ml),上皮生长因子(EGF)或碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)(50ng / ml; R&D Systems Europe,Lille,France),使用或不使用5μM伊马替尼(STI571; Novartis,Basel,Switzerland),用[3H]胸苷(Amersham France,Les Ulis,France)24小时,检测细胞增殖通过胸苷掺入(16)对于细胞计数,允许PASMC在Labtek 8室载玻片(Nunc,Wiesbaden,Germany)上粘附过夜,然后在48天内用上述条件处理

然后移除室,将载玻片在磷酸盐中洗涤 - 缓冲液,用丙酮固定,用4'-6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色

在Nikon eclipse 80i荧光显微镜下观察DAPI染色的细胞,自动计数DAPI阳性细胞(NIS元件) BR230软件)(Nikon France,Champigny sur Marne,France)细胞凋亡检测通过测量PASMCs中caspase 3和7活性来定量细胞凋亡使用Immunochemistry Technologies(ICT)的Magic Red在整个活细胞中检测Caspase活性

基于底物的MR-半胱天冬酶测定试剂盒根据制造商的说明书(Serotec,Dusseldorf,Germany)选择1mM过氧化氢作为SMC凋亡的阳性对照(17)PASMC迁移测定通过transwell测定评估PASMC迁移

胰蛋白酶消化的PASMCs是转移到8-μm孔transwell板(VWR,Fontenay-sous-Bois,France)PDGF-BB(10或100ng / ml),EGF或bFGF(50ng / ml;将含有或不含5μM伊马替尼的R&D Systems Europe(里尔,法国)加入到下室中在37℃下24小时后,通过计数用DiffQuick染色的膜底部的细胞来定量迁移

(Dade Behring SA,Paris la Defense,France)在高倍视野下用光学显微镜计算过滤器下表面上的细胞数(×200)在三个不同实验的每一个中计数八个视野

统计评估定量变量表示为意味着+ - SD组间比较,用Student t检验进行比较;多组比较采用方差分析,最小显着差异法作为事后分析P值小于005被认为反映统计学意义结果PDGF和PDGF-受体mRNA在微切割肺动脉PDGF-A,PDGF-B中的表达与对照组相比,来自显示严重PAH的患者的显微切割小肺动脉中PDGFR-α和PDGFR-βmRNA表达增加(总体肺部蛋白质印迹分析中的P PDGF-受体蛋白表达显示,蛋白质表达显着增加)

PAH肺中PDGFR-β与对照肺相比PDGFR-β蛋白表达归一化为β-肌动蛋白,对照肺为089±043,PAH肺为164±077(P = 001)(图2)免疫组织化学在小肺动脉中对于收缩性或丛状重塑,PDGF-A和PDGF-B的表达主要定位于平滑肌和内皮细胞(图3A,3C和4A)此外,血管周围炎性浸润,如果存在,显示强烈染色(图3A,5A和5B)PDGFR-α和PDGFR-β主要在SMC中表达,在较小程度上在内皮细胞中表达(图3B和3D) 在平滑肌和内皮细胞中均检测到PDGFR-β的磷酸化形式,这取决于收缩性和丛状病变的主要增殖性血管区(图4C-4D)

用PCNA鉴定增殖细胞,并对应于肺血管内的内皮细胞和SMC

损伤(图4B)PDGF-BB和伊马替尼对PDGFR-β磷酸化的影响与对照条件相比,10%/ ml PDGF-BB显着增加磷酸化PDGFR-β蛋白表达(伊马替尼对培养的PASMC增殖PASMC增殖的P效应, PDGF-BB 10ng / ml被伊马替尼(5μM)抑制,如通过[3H]胸苷掺入测定所证实的,以确定STI571对PDGF诱导的PASMC增殖的选择性,其他生长因子(EGF或bFGF,使用50 ng / ml两者均刺激PASMCs尽管伊马替尼显示出对PDGF-BB诱导的增殖的显着抑制(P我们证实了这种抑制剂)伊马替尼通过细胞计数对PDGFBB诱导的PASMC增殖的影响(图8)PDGF-BB(50ng / ml)诱导的PASMC增殖与PDGF-BB相似(10ng / ml)(1556±249%和1737 + - 对照条件的153%,P = 021)伊马替尼显着抑制PDGF-BB诱导的增殖10 ng / ml或50 ng / ml(P = 0001和P对伊马替尼对培养的PASMC细胞凋亡的影响虽然H2O2诱导显着的细胞凋亡(89) + - 72%活性caspase 3和7含有凋亡细胞),与未处理细胞相比,在伊马替尼处理的细胞中未检测到凋亡显着增加(分别为122±51%和108±38%; P = 068)(图9)此外,测量的伊马替尼相关的PASMC增殖抑制不是由于PASMC细胞死亡,因为在我们的实验条件下,伊马替尼没有诱导显着的caspase 3和7依赖性PASMC凋亡(图9) )PDGF和伊马替尼对PASMC迁移的影响PDGF-BB增加PASMC迁移(讨论我们的研究表明PDGF和PDGF受体mRNA在人肺动脉高压肺的肺动脉中过度表达,并且免疫染色在PASMCs和内皮细胞中定位PDGF / PDGFR

来自显示严重PAH的患者的肺动脉磷酸化(活化)PDGFR蛋白定位于具有PCNA和PDGF-B阳性细胞的增殖性肺动脉中体外,培养的人PASMC的PDGF-BB诱导的增殖和迁移被伊马替尼特异性抑制,通过阻断PDGFR磷酸化这些体外作用不是由于PASMC凋亡的诱导因为PASMC pro生命和迁移被认为是肺血管重塑(新内膜形成和介质肥大)的主要原因,这些发现有利于PDGF抑制在人类PAH治疗中的潜在相关性许多实验数据支持PDGF途径可能的概念在负责PAH进展的肺血管重塑过程中发挥重要作用(6,10)事实上,已知PDGF可诱导不同来源的SMCs增殖(18,19)

然而,它对SMC增殖和迁移有影响

在体循环中更好地描述它被认为是动脉粥样硬化等主要血管疾病的重要因素(20)我们目前的研究主要集中在PASMCs和人类特发性PAH,以更好地分析PDGF在人类中的作用,以及靶向PDGF途径的新型治疗剂的可能兴趣,如伊马替尼在PAH增殖和PASMCs迁移中的作用在肺血管重塑的发病机制中发现了一个单一的步骤许多研究已经解决了涉及新内膜形成的细胞的表型早期的研究结果表明,内皮细胞是丛状病变的主要表型(21),但最近PASMCs和PASMC的作用

新内膜形成的迁移得到了更好的澄清(22,23) 我们目前在PAH患者肺动脉壁中过度表达PDGF和PDGF受体的研究结果,以及PAH血管病变中PDGF途径激活的证据(通过免疫组织化学检测PDGFR-β磷酸化)与细胞增殖相关(PCNA阳性)细胞)和体外PDGF诱导的PASMCs迁移和增殖的证实,支持PDGF是PAH中肺血管重塑的主要贡献者的假设抑制PDGF诱导的PASMC迁移和增殖伊马替尼支持可能的治疗作用

PDGF抑制作为PAH的一种新方法,如先前在野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压的先驱研究中提出的那样(6),以及在上下文中显示难治性PAH(12,13)或严重PAH的受试者的病例报告慢性粒细胞白血病(14)伊马替尼是PDGF受体酪氨酸ATP结合位点的竞争性抑制剂目前用于治疗慢性粒细胞白血病和胃肠道间质瘤的激酶(24,25)细胞外信号相关激酶(ERK)磷酸化已被证明是PDGFR刺激的关键下游信号

它导致增殖,抑制细胞凋亡和基质金属蛋白酶激活是血管细胞迁移的关键步骤Schermuly及其同事(6)先前已经证实,在接触野百合碱的大鼠中,用50 mg / kg /天的伊马替尼治疗可以强烈抑制ERK1 / 2,并且伊马替尼可以逆转肺部该实验模型中的高血压因为PASMC增殖和迁移是PAH病理学的主要特征(2,3),伊马替尼对PDGF诱导的PASMC增殖和迁移的影响可能与PAH治疗相关(26)目前可用的PAH疗法有体外抗重建效应除了血管扩张剂特征外(1)然而,抗体极端蛋白的有力证明g对人体PAH肺血管过程的影响仍然缺乏确实,目前批准的PAH治疗(包括前列腺素衍生物,内皮素受体拮抗剂和5型磷酸二酯酶抑制剂)的长期治疗患者的肺病理仍显示主要的肺血管重塑因为病理学仅适用于PAH治疗难以治疗的患者(即从肺外植体或死后标本获得的数据),人们可能会声称对PAH特异性治疗反应良好的患者可能具有更好的抗重建效果

然而,很好地证明了肺部即使在PAH治疗的长期有益效果的患者中,血流动力学仍然极为异常,表明即使在良好的反应者中肺血管重塑仍然是显着的(1)为了减少PAH中的肺血管重塑,必须正确评估生长因子抑制

人体细胞中的概念验证研究d组织支持这样的观点,即PDGF靶向治疗应该在未来精心设计的临床试验中进行测试,评估人体PAH的安全性和有效性

(26)利益冲突声明:FP与有兴趣的商业实体没有财务关系在本手稿的主题中,DM与对本手稿主题感兴趣的商业实体没有财务关系PD与对此手稿ID主题感兴趣的商业实体没有财务关系 - G与对本手稿主题感兴趣的商业实体没有财务关系CT与与本手稿主题无关的商业实体没有财务关系JLP与本手稿没有财务关系对本手稿MM主题感兴趣的商业实体与商业实体没有财务关系对本手稿的主题感兴趣EF与与本手稿主题无关的商业实体没有财务关系SM与对此主题感兴趣的商业实体没有财务关系手稿OM与对本手稿PH主题感兴趣的商业实体没有财务关系 与本文件主题有利害关系的商业实体没有财务关系DE与与本手稿主题不相关的商业实体没有财务关系SE与之没有财务关系对本手稿主题感兴趣的商业实体GS与对本手稿主题感兴趣的商业实体没有财务关系RS与对该手稿有兴趣的商业实体没有财务关系这份手稿的主题MH在2004年,2005年和2006年从诺华公司获得了V3,000,为重症哮喘咨询委员会做出了贡献他在2004年,2005年和2006年从诺华公司获得了V3,000,参加了关于严重哮喘的讲座

一瞥科学评论关于受试者的知识血小板衍生生长因子(PDGF)在实验性肺动脉高压的进展中起重要作用,但其在人体中的作用肺部动脉高血压仅部分了解本研究增加了肺部动脉高血压患者肺动脉中PDGF和PDGF受体的表达增加PDGF诱导人肺动脉平滑肌细胞的增殖和迁移,其受到抑制伊马替尼,一种PDGF受体抑制剂参考文献1 Humbert M,Sitbon O,Simonneau G治疗肺动脉高压N Engl J Med 2004; 351:1425-1436 2 Pietra GG,Capron F,Stewart S,Leone O,Humbert M,Robbins IM ,Reid LM,Tuder RM肺动脉高压血管病变的病理评估J Am Coll Cardiol 2004; 43(12,Suppl S):25S-32S 3 Humbert M,Morrell NW,Archer SL,Stenmark KR,MacLean MR,Lang IM,Christman BW,Weir EK,Eickelberg O,Voelkel NF,et al allular and molecular pathobiology of pulmonary arterial hypertension J Am Coll Cardiol 2004; 43(12,Suppl S):13S-24S 4 Machado RD,Pauciulo MW,Thomson JR,Lane KB ,Morgan NV,Wheeler L, Phillips JA III,Newman J,Williams D,Galie N等,BMPR2 haploinsufficiency作为原发性肺动脉高压的遗传分子机制Am J Hum Genet 2001; 68:92-102 5 Humbert M,Monti G,Fartoukh M,Magnan A, Brenot F,Rain B,Capron F,Galanaud P,Duroux P,Simonneau G,et al Plateletderived growth factor expression in primary pulmonary hypertension:HIV血清阳性与HIV血清阴性患者的比较Eur Respir J 1998; 11:554-559 6 Schermuly RT ,Dony E,Ghofrani HA,Pullamsetti S,Savai R,Roth M,Sydykov A,Lai YJ,Weissmann N,Seeger W,et al Reversal of experimental pulmonary hypertension by PDGF inhibition J Clin Invest 2005; 115:2811-2821 7 Heldin CH,Westermark B血小板衍生生长因子的作用机制和体内作用Physiol Rev 1999; 79:1283-1316 8 Reigstad LJ,Varhaug JE,L​​illehaug JR PDGF-C和PDGF-D的结构和功能特异性,小说血小板衍生生长因子家族的成员FEBS J 2005; 272:5723- 5741 9 Berk BC,Alexander RW,Brock TA,Gimbrone MA Jr,Webb RC Vasoconstriction:血小板衍生生长因子的新活动Science 1986; 232:87-90 10 Balasubramaniam V,Le Cras TD,Ivy DD,Grover TR,Kinsella JP ,Abman SH血小板衍生生长因子在绵羊胎儿肺动脉高压期间血管重塑中的作用Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2003; 284:L826-L833 11 Druker BJ Imatinib作为靶向治疗的范例Adv Cancer Res 2004; 91 :1-30 12 Ghofrani HA,Seeger W,Grimminger F Imatinib用于治疗肺动脉高压N Engl J Med 2005; 353:1412-1413 13 Patterson KC,Weissmann A,Ahmadi T,Farber HW Imatinib甲磺酸盐治疗难治性特发性肺动脉高压Ann Intern Med 2006; 145:152-153 14 Souza R,Sitbon O,Parent F,Simonneau G,HumbertM长期伊马替尼治疗肺动脉高压Thorax 2006; 61:736 15 Dorfmuller P,Zarka V, Durand-Gasselin I,Monti G,Balabanian K,Garcia G,Capr F,Coulomb-Lhermine A,Marfaing-Koka A,Simonneau G,et al Chemokine RANTES in severe pulmonary arterial hypertension Am J Respir Crit Care Med 2002; 165:534-539 16 Eddahibi S,Humbert M,Fadel E,Raffestin B ,Darmon M,Capron F,Simonneau G,Dartevelle P,Hamon M,Adnot S 5-羟色胺转运体过度表达是原发性肺动脉高压肺动脉平滑肌增生的原因J Clin Invest 2001; 108:1141-1150 17 Deshpande NN,Sorescu D,Seshiah P,Ushio-Fukai M,Akers M,Yin Q,Griendling KK血管平滑肌中过氧化氢诱导的细胞周期停滞的机制Antioxid Redox Signal 2002; 4:845-854 18 Yahiaoui L,Villeneuve A,Valderrama-Carvajal H,Burke F,Fixman ED内皮素-1在大鼠气管平滑肌细胞中单独和协同地调节PDGF的增殖反应Cell Physiol Biochem 2006; 17:37-46 19 Deng DX,Spin JM,Tsalenko A,Vailaya A,Ben-Dor A,Yakhini Z,Tsao P,Bruhn L,Quertermous T确定冠状动脉和隐静脉平滑肌细胞表型的分子特征:对刺激的不同反应Arterioscler Thromb Vasc Biol 2006; 26:1058-1065 20 Raines EW PDGF and cardiovascular disease Cytokine Growth Factor Rev 2004; 15:237-254 21 Tuder RM,Groves B,Badesch DB,Voelkel NF旺盛的内皮细胞生长和炎症因子存在于肺动脉高压的丛状病变中Am J Pathol 1994; 144:275-285 22易E S,Kim H,Ahn H,Strother J,Morris T,Masliah E,Hansen LA,Park K,Friedman PJ阻塞性内膜病变的分布及其在慢性肺动脉高压中的细胞表型:形态学和免疫组化研究Am J Respir Crit Care Med 2000; 162:1577-1586 23 Nishimura T,Vaszar LT,Faul JL,Zhao G,Berry GJ,Shi L,Qiu D,Benson G,Pearl RG,Kao PN辛伐他汀通过诱导新生内膜平滑的细胞凋亡来挽救致死性肺动脉高压大鼠肌肉细胞Circulation 2003; 108:1640-1645 24 Druker BJ,Talpaz M,Resta DJ,Peng B,Buchdunger E,Ford JM,Lydon NB,Kantarjian H,Capdeville R,Ohno-Jones S,et al afficacy and safety of a慢性粒细胞白血病中BCR-ABL酪氨酸激酶的特异性抑制剂N Engl J Med 2001; 344:1031-1037 25 Peng B,Lloyd P,Schran H伊马替尼临床药代动力学Clin Pharmacokinet 2005; 44:879-894 26 Humbert M Update肺动脉高压2007 Am Am Respir Crit Care Med 2008; 177:574-579 Frederic Perros1 ,2,3,David Montani1,2,Peter Dorfmuller1,2,Ingrid Durand-Gasselin2,Colas Tcherakian1,2,Jerome Le Pavec1,Michel Mazmanian3,Elie Fadel3,Sacha Mussot3,Olaf Mercier3,Philippe Herve3,Dominique Emilie2,Saadia Eddahibi4, Gerald Simonneau1,Rogerio Souza1,2和Marc Humbert1,2 1 Universite Paris-Sud 11,UPRES EA 2705,中心国家参考高血压Arterielle Pulmonaire,Service de Pneumologie et Reanimation Respiratoire,Institut Paris-Sud Cytokines,Hopital Antoine -Beclere,法国克拉马特巴黎Hopitaux de Paris; 2 INSERM U764,Clamart,France; 3 UPRES EA 2705,Laboratoire de Chirurgie Experimentale,Center Chirurgical Marie Lannelongue,Universite Paris-Sud 11,Le Plessis Robinson,France; 4 INSERM U841和生理学探索部门,Hopital Henri-Mondor,法国巴黎Creteque Hopitaux de Paris,2007年7月14日收到原始表格; 2008年4月15日以最终形式获得批准Ministere de l'Enseignement Superieur et de la Recherche(GIS-HTAP),Chancellerie des Universites,Legs Poix和Universite Paris-Sud这个研究项目得到了欧盟委员会根据第6框架计划提供的财政支持(合同没有LSHM-CT- 2005-018725,PULMOTENSION)本出版物仅反映作者的观点,欧洲共同体对其中包含的信息的任何使用不承担任何责任FP由Ministere de l'Enseignement Superieur et de的资助支持la Recherche RS得到了欧洲呼吸学会的资助

作者感谢Steve Pascoe,医学博士,硕士,诺华,英国霍舍姆,感谢伊马替尼的礼物通信和请求重印版本应发给Marc Humbert,医学博士,博士,服务和肺部再生呼吸,Hopital Antoine-Beclere,157 rue de la Porte de Trivaux,92140 Clamart,France电子邮件:[email protected] Am J Respir Crit Care Med Vol 178 pp 81-88,2008最初于2008年4月17日在出版社出版DOI:101164 / rccm200707-1037OC互联网地址:wwwatsjournalsorg版权所有美国胸科协会2008年7月1日最初由Perros,Frederic Montani,David出版;多夫米勒,彼得; Durand- Gasselin,Ingrid; Tcherakian,Colas; Pavec,Jerome Le; Mazmanian,Michel; Fadel,Elie; Mussot,Sacha; Mercier,奥拉夫;爱丽丝,菲利普; Emilie,多米尼克; Eddahibi,Saadia;杰拉尔德西蒙诺; Souza,Rogerio (c)2008年美国呼吸与危重症医学杂志由ProQuest提供信息和学习保留所有权利

作者:山吉汽